Trang: 31
Tập XXVI, số 8 (181) 2016
Xây dựng quy trình Real time PCR đa mồi phát hiện một số chủng Papillomavirus nguy cơ cao gây ung thư đường sinh dục - hậu môn
Development of multiplex Real time PCR method for the detection of several high risk human papillomavirus types causing anal-genital cancers
Tác giả: Nguyễn Thanh Tâm, Nguyễn Phương Anh, Lê Thị Ngân, Nguyễn Vân Trang
Tóm tắt:
Human papillomavirus (HPV) là tác nhân thường gặp nhất trong các nhiễm trùng lây truyền qua đường tình dục và là nguyên nhân quan trọng dẫn tới ung thư cổ tử cung (UTCTC) và các ung thư đường sinh dục/hậu môn khác. Hiện nay, các kỹ thuật xét nghiệm tế bào học, giải phẫu bệnh, soi cổ tử cung đều khó có thể xác định chính xác sự có mặt của HPV ở giai đoạn sớm do trạng thái nhiễm tiềm ẩn của HPV thường kéo dài từ 1-8 tháng sau khi xâm nhập, vi rút không phát triển, không gây tổn thương, có hoặc không có các triệu chứng nhẹ, không đặc hiệu. Nhưng xét nghiệm sinh học phân tử có độ nhạy cao như lai phân tử hoặc PCR lại có khả năng phát hiện được HPV ở giai đoạn sớm. Trong nghiên cứu này, quy trình Real time PCR được xây dựng để phát hiện một số chủng HPV có nguy cơ cao từ mẫu dịch phết cổ tử cung ở nữ giới. Sau khi tối ưu hoá các điều kiện phản ứng, độ nhạy, đặc hiệu, giới hạn phát hiện của quy trình được đánh giá sử dụng bộ mẫu chuẩn bao gồm 14 chủng HPV nguy cơ cao và các mẫu âm tính với HPV-ADN. Kết quả cho thấy quy trình xét nghiệm có độ nhạy, độ đặc hiệu 100%, trong khi đó giới hạn phát hiện của phản ứng tương ứng với HPV16, HPV18 và HPV33/52 là 3, 3, 30/30 bản sao/phản ứng. Nghiên cứu đang tiếp tục để phát triển kỹ thuật xét nghiệm phát hiện các chủng HPV có nguy cơ cao khác.
Summary:
Human papillomavirus (HPV) is the most common sexual transmitted pathogen. It is also the most important cause of cervical cancer and other anogenital cancers. At presence, cytology method (i.e PAP SMEAR), colposcopy did not allow precise identification of HPV present, especially in the early stage of infection when there is a latent state of HPV up to 8 months after infection without clinical symptoms. Molecular method such as hydrization and PCR allow detection of the virus during this early stage. In this study, we established detection method for the identication of several high-risk HPV by multiplex Realtime PCR. Following optimization, sensitivity, specificity and detection limit of the method were evaluated using the set samples including 14 different HPV high risk genotypes and samples negative with HPV-DNASensitivity and specificity of the method are 100%, whereas detection limit for HPV16, HPV18 and HPV33/52 are 3, 3, 30/30 copies/reaction, respecitively; no apparent cross reaction with other high risk types identified.Effort is on-going to extend the detection of other high risk type and some important low risk HPV types.
Từ khóa:
Human papillomavirus, Realtime PCR, ung thư cổ tử cung
Keywords:
Human papillomavirus, Realtime PCR, cervical cancer
File nội dung:
O160831.pdf
Tải file:
