Trang: 87
Tập 27, số 3 2017
Ứng dụng kỹ thuật multiplex RT- PCR xác định vi rút dengue trên muỗi tại Hà Nội, năm 2015
Application of multiplex RT- PCR technique for detection of dengue viruses from mosquitoes collected in Hanoi, 2015
Tác giả: Nguyễn Thị Kiều Anh, Nguyễn Mạnh Hùng, Trần Vũ Phong, Nguyễn Văn Soái, Vũ
Văn Thành, Nguyễn Nhật Cảm
Tóm tắt:
Tại Hà Nội, bệnh sốt xuất huyết dengue (SXHD) được coi là bệnh lưu hành địa phương, mỗi năm có tới hàng nghìn ca mắc tại 30/30 quận huyện với hàng nghìn ổ dịch. Vì vậy, việc giám sát véc-tơ và xác định sớm vi rút dengue (DV) ở muỗi sẽ giúp cho việc chủ động phòng chống dịch hiệu quả. Mục tiêu: (1) Xác nhận quy trình multiplex RT – PCR phát hiện ARN của DV trên muỗi Aedes aegypti; (2) Áp dụng kỹ thuật multiplex RT – PCR phát hiện ARN của vi rút dengue trên muỗi Aedes aegypti thu thập tại Hà Nội, năm 2015. Việc xác nhận quy trình multiplex RT – PCR phát hiện ARN củaDV trên muỗi Aedes aegyptiđược thực hiện chủ yếu là tối ưu hóa quy trình tách chiết ARN từ muỗi. Thử nghiệm tách chiết ARN từ muỗi đã được tiến hành trên muỗi gây nhiễm DV nhân tạo bằng cách cho muỗi hút máu cừu trộn với chủng DV (4 týp) với các bộ sinh phẩm tách chiết và hạt bead kích thước khác nhau. Kết quả cho thấy, sử dụng bộ sinh phẩm tách chiết ARN của Qiagen, với hạt bead kích thước 0,5mm và máy nghiền beadbitter cho kết quả tách chiết tối ưu nhất. Chưa phát hiện được cá thể muỗi Aedes aegypti nào mang DV trong tổng số 247 muỗi cái thu thập tại 28 ổ dịch trên địa bàn Hà Nội, 2015 bằng kỹ thuật Multiplex RT - PCR.
Summary:
In Hanoi, dengue heamorrhagic fever (DHF)
is endemic, occuring in 30/30 districts with
thoudsands cases, outbreaks per year. Therefore,
the surveillance and determination of dengue
viruses in the vectors will help to effectively
intervent and control the disease. The purpose
of this study is to verify multiplex RT - PCR
technique for determination of dengue virus
RNA in mosquitoes, andto apply the multiplex
RT - PCR technique to detect the RNA of
dengue viruses from Aedes aegypti mosquitoes
collected in Hanoi, 2015. The verification
of multiplex RT - PCR for identification of
dengues virus in mosquitoes was mainly based
on the optimization of RNA extraction from
Aedes aegypti mosquitoes. The expirements to
extract RNA from mosquitoes were performed
with different RNA extraction kits and bead
diameters by using artificial dengue infected
mosquitoes which were withdrawn sheep blood
mixed with four different types of dengue
viruses; mosquitoes addded dengues viruses
and dengues viruse strains. The results showed
that the optimized kit and bead diametter for
RNA extraction from mosquitoes is Qiagen kit
and 0,5mm diametter of the bead. Among 247
collected Aedes aegypti from 28 outbreaks in
Hanoi, 2015, dengue virus was notdetected by
multiplex RT - PCR.
Từ khóa:
Vi rút dengue, multiplex RT - PCR, muỗi
Keywords:
dengues viruses,multiplex RT - PCR, mosquitoes
File nội dung:
o170387.pdf
Tải file:
