Trang: 253

Tập 27, số 6 2017 Phụ bản

Preliminary results of extraction of Pertussis toxin antigen by affinity chromatography using fetuin sepharose 4b collumn

Tác giả: Nguyễn Thị Lan Phương, Lê Văn Bé

Tóm tắt:
Nghiên cứu được thực hiện nhằm thăm dò khả năng phân tách kháng nguyên PT ra khỏi hỗn dịch kháng nguyên thô dựa vào tính ái lực của PT với một protein gắn đặc hiệu đóng vai trò như một ligand. Canh cấy chủng sản xuất vắc xin ho gà BP.509 nuôi cấy trên môi trường đặc hiệu sinh PT được thu nhận và kết tủa bằng amonisulfate (30%) sau đó hoàn nguyên trong đệm phophate pH 7,2 để thu dung dịch kháng nguyên thô. Kháng nguyên độc tố ho gà PT được thu nhận khi thực hiện sắc ký ái lực qua cột sepharose 4B-fetuin. Kết quả ban đầu với 3 lô NC-0116, NC-0416 và NC-0516 đã thu được PT tinh chế bảo toàn được hoạt tính gây độc đặc hiệu trên tế bào CHO/K1 và có độ tinh sạch đạt 77,62%. Hiệu suất toàn qui trình đạt trung bình 56,8%. Nghiên cứu đang tiếp tục được cải tiến để tăng hiệu suất và độ tinh khiết của sản phẩm tinh chế.

Summary:
The study was conducted to investigate the ability of PT antigen extraction from crude antigen suspension based on PT affinity to a specific protein as a ligand. BP.509 strain was cultured in a specific inducing PT media and precipitated in amonisulfate to final concentration of 30%. Then the cell pellets were resuspended in phosphate buffer pH 7,2. The PT antigen was purified by affinity chromatography using fetuin binding sepharose 4B collumn. The preliminary results with 3 batches of NC-0116, NC-0416 and NC-0516 showed that the PT purified antigen has preserved its specific toxicity on CHO/K1 cells and the product got 77,62% of purity. The productivity of whole proccess achieved 56.8% at mean. In addition, IVAC keeps studying to improve the productivity and purity of PT purified antigen

Từ khóa:
Độc tố ho gà, chủng ho gà BP.509, cột sepharose 4B-fetuin

Keywords:
Pertussis toxin, BP.509 strain of pertussis, sepharose 4B-fetuin collumn

File nội dung:
o176p253.pdf

Tải file:

Tải file với tiền ảo trong tài khoản thành viên.