Thứ tư, 13/12/2017
 NămSố
 Từ khóa
 Tác giả
Tìm thông tin khác
Đánh giá thực trạng công tác y tế trường học ở các trường trung học cơ sở tại thành phố Tuyên Quang, tỉnh Tuyên Quang năm 2016
Đánh giá chi phí – hiệu quả của chương trình can thiệp dự phòng lây nhiễm HPV trên phụ nữ 15-49 tuổi đã có gia đình tại Thị xã Chí Linh – tỉnh Hải Dương
Tình trạng miễn dịch đối với sởi của một số nhóm trẻ em và phụ nữ ở một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, năm 2013
ads
Trang: 526
Tập 27, số 8 2017

Áp dụng dung dịch ly giải tế bào (TpLR) trong tách chiết nhanh ARN trên nuôi cấy tế bào

Application of a rapid lysis buffer (TpLR) for rapid RNA extraction from cell culture
Tác giả: Nguyễn Thị Thường, Nguyễn Đăng Hiền, Nguyễn Trần Hiển, Trần Thị Hiền, Phạm Thị Bích Ngọc, Thẩm Chí Dũng
Tóm tắt:
ARN có chất lượng là yếu tố đầu tiên và quan trọng nhất ảnh hưởng đến RT-PCR nên rất cần nỗ lực để đơn giản hóa và tăng cường chất lượng tách chiết. Dung dịch ly giải nhanh tế bào (TpLR) đã được sử dụng thành công trong tách chiết ADN, xây dựng các phương pháp mới trong chẩn đoán, nghiên cứu, và sản xuất. Nghiên cứu này xác định đầy đủ hơn sự tương quan và tính bền vững của ARN tách chiết bằng TpLR và sinh phẩm thương mại sau khi gây nhiễm vắc-xin sởi trên tế bào Vero ở nồng độ đặc và pha loãng hàng loạt bậc mười từ 10-1 đến 10-4 và định lượng RNA bên trong tế bào sau 72 giờ gây nhiễm với các điều kiện bảo quản theo nhiệt độ và thời gian thực (17 tháng ở -80oC và -30oC). Kết quả cho thấy tách chiết ARN bằng TpLR và sinh phẩm thương mại cho kết quả tương đương với R2 của giá trị chu kỳ ngưỡng (Ct) từng cặp dao động từ 0,92-1,0 sau gây nhiễm 24, 48, và 72 giờ. Hiệu giá tuyệt đối ARN không khác biệt sau 12 và 15 tháng ở -80oC, và 2 tháng bảo quản tiếp ở -30oC. Có thể sử dụng TpLR để tách chiết ARN trên nuôi cấy tế bào với ưu điểm đáng kể về thời gian, kinh phí và hiệu suất thực hiện.
Summary:
Qualified RNA is the first and most important factor affecting the RT-PCR. It is essential to put efforts to simplify and improve the RNA extraction quality. The rapid lysis buffers (TpLRs) have been successfully applied in DNA extraction, development of new methods in diagnostics, research, and production. This study determined, in another aspect, the correlation of a TpLR and commercial test kit (Qiagen), the stability of RNA extracted by the study reagent after inoculating measles vaccine undiluted and ten-fold serial dilutions from 10-1 to 10-4 on Vero cells. RNA within the infected cells was quantified after 72 hours post inoculation and at different conditions of real temperatures and real times (total of 17 months at -80oC and -30oC). The results showed that the ARN extraction efficiency by TpLR and Qiagen kit was similar with R2 of threshold value (Ct) by pairs felt within the range of 0.92-1.0 at all time points of 24, 48, and 72 hours post-inoculation. Absolute RNA titers of both reagents did not differ significantly after 12 and 15 months at -80oC as well as 2 next consecutive months at -30oC. We concluded that the study TpLR could be used for RNA extraction from infected cells with remarkable advantages in the time, cost, and performance.
Từ khóa:
TpLR, tách chiết, ARN, sởi.
Keywords:
TpLR, extraction, RNA, measles.
File nội dung:
o1708526.pdf
Tải file:
Tải file với tiền ảo trong tài khoản thành viên.
Thông tin trong cùng số xuất bản:
Nhân dịp kỷ niệm 55 năm thành lập, Hội Y học Dự phòng Việt Nam tổ chức Hội nghị Khoa học toàn quốc vào tháng 10 năm 2017 tại Đà Nẵng. Kính mời Quý đồng nghiệp đăng ký và nộp báo cáo trình bày tại Hội nghị. Các báo cáo được trình bày tại Hội nghị sẽ được lựa chọn để đăng trên Số Đặc Biệt của Tạp chí Y học Dự phòng năm 2017. (Chi tiết xin click vào hình)
Website www.tapchiyhocduphong.vn được phát triển bởi đơn vị thiết kế web: OnIP™ (www.onip.vn - mCMS).
log