Trang: 81
Tập 27, số 11 2017
Biểu hiện và tinh chế protein IpaB của Shigella sonnei
Expression and purification of recombinant IpaB protein from Shigella sonnei
Tác giả: Nguyễn Minh Trí, Phan Thị Phượng Trang, Phạm Thị Kim Thanh, Stephen Baker,
Nguyễn Đức Hoàng
Tóm tắt:
Shigella sonnei (S. sonnei) là vi khuẩn Gram âm gây bệnh tiêu chảy ở người, gây ra hàng ngàn ca tử vong
hàng năm. Đặc biệt, chủng vi khuẩn này càng nguy hiểm do sự xuất hiện của các chủng kháng kháng sinh
gây khó khăn trong điều trị. Đồng thời, trong những năm gần đây, S. sonnei trở thành tác nhân gây bệnh
chính thay cho Shigella flexneri (S. flexneri), trong khi các nghiên cứu về vắc-xin trước đây chủ yếu tập
trung vào S. flexneri. Các nghiên cứu trên S. flexneri đã cho thấy rằng, protein IpaB thuộc hệ thống tiết
loại III (T3SS) được đánh giá là một protein tiềm năng trong phát triển vắc-xin nhưng IpaB có khả năng
gây chết đại thực bào trong một số nghiên cứu. Do đó, nhằm định hướng phát triển vắc-xin cho S. sonnei,
vector pHT2035 mang một phần gene ipaB (p-ipaB) của S. sonnei được dòng hóa và biểu hiện trong E.coli
BL21(DE3). Sau quá trình khảo sát biểu hiện trong các điều kiện khác nhau, p-IpaB được biểu hiện và tinh
chế thông qua phương pháp sắc ký ái lực dựa trên đuôi 6xHis. Kết quả đã thu nhận được vector biểu hiện
protein IpaB, khảo sát điều kiện biểu hiện và tinh chế được protein p-IpaB.
Summary:
Shigella sonnei (S. sonnei) is a Gram-negative
bacteria causing human diarrhoea, which has
led to the thousands of deaths annually. This
particularly becomes increasingly dangerous
mainly because of the presence of the antibiotic
resistance in this bacteria, which result in the
difficulty of therapeutic methods. Besides, in
recent years, it is reported that S. sonnei has
become the major pathogenic human instead
of S. flexneri whereas the most of researchers
focused primarily on S. flexneri in developing
vaccine for Shigella. The studies on S. flexneri
revealed that IpaB protein belonging to of Type
III Secreted System (T3SS) complex has been
evaluated as a potential antigen for vaccine
approaches. Nevertheless, several researchers
indicated that this protein presented abilities
to induce macrophage apoptosis. Therefore,
in term of vaccine development for S. sonnei,
the partial ipaB gene (p-ipaB) encoding for the
fragment of IpaB was cloned into pHT2035.
Subsequently, numerous of conditions for
expressing the target protein was investigated.
This allowed us to proceed to the following
stage, which was to purify the interest protein
throughout His-tag depending on the affinity
chromatography. The result showed that we
could construct plasmid pHT2035 containing
p-ipaB, investigation the condition to express
the recombinant protein and purify p-IpaB
protein.
Từ khóa:
Shigella sonnei, vắc-xin, IpaB, T3SS
Keywords:
Shigella sonnei, vaccine, IpaB, T3SS
File nội dung:
o1711081.pdf
Tải file: