Chủ nhật, 19/08/2018
 NămSố
 Từ khóa
 Tác giả
Tìm thông tin khác
Đánh giá thực trạng công tác y tế trường học ở các trường trung học cơ sở tại thành phố Tuyên Quang, tỉnh Tuyên Quang năm 2016
Đánh giá chi phí – hiệu quả của chương trình can thiệp dự phòng lây nhiễm HPV trên phụ nữ 15-49 tuổi đã có gia đình tại Thị xã Chí Linh – tỉnh Hải Dương
Tình trạng miễn dịch đối với sởi của một số nhóm trẻ em và phụ nữ ở một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, năm 2013
ads
Trang: 50
Tập 27, số 13 2017

Đánh giá kỹ thuật Nested PCR một ốngcải tiến cho chẩn đoán vi khuẩn Clostridium difficile sinh độc tố gây tiêu chảy sau dùng kháng sinh ở Việt Nam

Validation of a modified single-tube nested PCR for detection of toxigenic Clostridium difficile in patients with antibiotics-associated diarrhea in Vietnam
Tác giả: Vũ Thị Thu Hường, Lê Thị Trang, Phùng Thị Thu Hằng, Tăng Thị Nga, Đỗ Thị Quỳnh Nga, Trần Thị Hải Âu, Vũ Thị Kim Liên
Tóm tắt:
Chúng tôi đã cải tiến quy trình nested PCR mở ống truyền thống (nested PCR hai ống) thành nested PCR một ống, nhằm phát hiện gen sinh độc tố TcdB của vi khuẩn Clostridium difficile. Bước cải tiến bao gồm 4 trình tự mồi được trộn trong một ống phản ứng PCR duy nhất, không mở ống trong các chu kỳ nhân gen, chu trình nhiệt gồm 2 giai đoạn nhân gen với 2 nhiệt độ lai khác nhau 15oC, tương ứng với nhiệt độ lai tối ưu của hai cặp mồi ngoài và trong. Giới hạn phát hiện của quy trình nested PCR một ống là 101 copies/ phản ứng. Trên 54 mẫu phân của bệnh nhân tiêu chảy sau dùng kháng sinh, so với nuôi cấy, nested PCR một ống có độ nhạy và độ đặc hiệu lâm sàng, giá trị dự đoán dương tính, giá trị dự đoán âm tính lần lượt là 95,8%, 100%, 100% và 96,8%, tương đương với quy trình nested PCR hai ống. Quy trình Nested PCR một ống cải tiến có ưu điểm tránh nhiễm chéo, giảm thời gian và chi phí xét nghiệm, đồng thời có hiệu quả phát hiện gen sinh độc tố TcdB của C. difficile tương đương nested PCR hai ống, vì vậy, có thể sử dụng làm một trong những xét nghiệm tại chỗ cho chẩn đoán nhiễm trùng do C. difficile tại các cơ sở y tế ở Việt Nam.
Summary:
We modified standard nested PCR (double-tube, open-tube) to single-tube nested PCR (closed-tube) for detection of toxin B gene of Clostridium difficile in patients with antibiotics-associated diarrhea. The modification included a mixture of 4 outer and inner primers in one PCR tube, a cycling profile of 2 amplification steps with 2 optimal annealing temperatures for outer and inner primers. Melting temperature of outer primers was 15oC higher than those of inner primers. Our results showed that detection limit of the single-tube nested PCR assay was 101copies/reaction. The nested PCR assay was then applied on 54 stool samples of patients antibiotics-associated diarrhea. PCR results were compared with culture results. Clinical sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value for single-tube nested PCR were 95%, 92,6%,73,1% and 98,9%, respectively. Single-tube nested PCR assay has advantages in reducing cross-contamination risks, cost and run time, as compared to standard nested PCR, thus can serve as one of point-of-care diagnostic methods to diagnose C. difficile infection in Vietnam
Từ khóa:
Clostridium difficile, Nested- PCR, Tiêu chảy sau dùng kháng sinh
Keywords:
JClostridium difficile, Single-tube nested PCR, antibiotics-associated diarrhea
File nội dung:
o171350.pdf
Tải file:
Tải file với tiền ảo trong tài khoản thành viên.
Thông tin trong cùng số xuất bản:
Tạp chí Y học Dự phòng (Hội Y học Dự phòng Việt Nam) phối hợp cùng Báo nhi đồng (Trung ương Đoàn TNCS HCM)tổ chức cuộc thi Học viện Y học nhí - 2018 cho các bé trong độ tuổi 3-12 tuổi. Ban tổ chức mong nhận được sự tham gia ủng hộ của các cá nhân và đơn vị.
Website www.tapchiyhocduphong.vn được phát triển bởi đơn vị thiết kế web: OnIP™ (www.onip.vn - mCMS).
log