Trang: 26
Tập 28, số 12 2018
Xác định nhiễm Mycoplasma trong quá trình nuôi cấy tế bào
Detection of Mycoplasma contamination in cell cultures
Tác giả: Nguyễn Phương Anh*, Phạm Thị Hiền, Trần Thị Thu Hương, Nguyễn Thanh Thuỷ,
Nguyễn Vũ Sơn, Vương Đức Cường, Hoàng Thị Thu Hương
Tóm tắt:
Mycoplasma là vi khuẩn gây bệnh trên người, động vật, thực vật và côn trùng. Nhiễm mycoplasma tế bào
nuôi cấy không chỉ ảnh hưởng đến sự thuần khiết, chất lượng của dòng tế bào mà còn ảnh hưởng tới kết
quả nghiên cứu. Áp dụng kỹ thuật PCR xác định mycoplasma trong tế bào nuôi cấy là phương pháp hiệu
quả với độ nhạy, độ đặc hiệu và độ chính xác cao, thực hiện đơn giản với sinh phẩm thương mại. Sử dụng
bộ sinh phẩm e-MycoTM Mycoplasma PCR Detection kit (ver 02.0 for 20μl rxn) - iNtRON Biotechnology
để thực hiện kiểm tra mycoplasma trên 4 dòng tế bào thường trực MDCK, HEp 2, A549, và Vero E6 đã
xác định 1/4 dòng tế bào (Vero E6) nhiễm mycoplasma. Kết quả này được khẳng định khi kiểm tra dòng tế
bào bị nhiễm mycoplasma (Vero E6) bằng kỹ thuật cắt lát siêu mỏng sử dụng kính hiển vi điện tử truyền
qua JEOL 1010. Việc kiểm soát mycoplasma theo một quy trình chuẩn (SOP) là một yêu cầu bắt buộc
đối với tất cả các phòng thí nghiệm sử dụng tế bào, giúp phòng tránh và giảm thiểu tối đa sự lây nhiễm
mycoplasma trong quá trình nuôi cấy, đảm bảo và nâng cao chất lượng kết quả nghiên cứu.
Summary:
Mycoplasma is a bacteria causing disease
in humans, animals, plants and insects.
Mycoplasma contamination of cell cultures
not only affects the purity and quality of the
cell line but also affects the result of the study.
Detecting mycoplasma contamination in cell
cultures by PCR is an effective method with
high sensitivity, specificity and accuracy, which
is simple to do with commercial kits. Using the
e-MycoTM Mycoplasma PCR Detection kit (ver
02.0 for 20μl rxn- iNtRON Biotechnology) to
detect mycoplasma on 4 cell lines MDCK, Hep
2, A549 and Vero E6; we detected 1/4 cell lines
(Vero E6) infecting with mycoplasma. The
mycoplasma-infected cell line (Vero E6) was
confirmed by ultra-thin slices method using
transmission electron microscope JEOL 1010
(TEM). Control of mycoplasma following
a standard procedure (SOP) is a mandatory
requirement for all laboratories using cells
cultures, which helps to prevent and minimize
the mycoplasma contamination in cell cultures
and improve the quality of research results.
Từ khóa:
Từ khóa: Mycoplasma; PCR; nuôi cấy tế bào.
Keywords:
Keywords: Mycoplasma, PCR, cell culture
File nội dung:
o181226.pdf
Tải file:
