Trang: 148
Tập 29, số 11 2019
BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG QUY TRÌNH MAC-ELISA PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ IGM KHÁNG VI RÚT ZIKA
PRELIMINARY DEVELOPMENT OF MAC-ELISA TESTING FOR DETECTION IGM ANTIBODY ANTI ZIKA VIRUS
Tác giả: Nguyễn Hoàng Quân, Huỳnh Thị Kim Loan, Đào Huy Mạnh, Nguyễn Thanh Vũ,
Huỳnh Phương Thảo, Phạm Thị Thu Hằng, Vũ Phạm Hồng Nhung,
Hoàng Thị Như Đào, Vũ Phạm Hồng Châu, Lê Minh Hiếu, Cao Minh Thắng,
Nguyễn Vũ Thượng
Tóm tắt:
Việt Nam đã ghi nhận trường hợp nhiễm vi rút Zika (ZIKV) đầu tiên tại thành phố Hồ Chí Minh, Khánh Hòa vào tháng 4 năm 2016. Sau đó, ngày càng có nhiều ca nhiễm ZIKV được phát hiện. Xét nghiệm MACELISA là xét nghiệm nhằm phát hiện kháng thể IgM kháng ZIKV được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu huyết thanh học ZIKV. Viện Pasteur TP. Hồ Chí Minh tiến hành xây dựng quy trình MAC-ELISA phát hiện
kháng thể IgM kháng ZIKV nhằm phục vụ cho công tác xét nghiệm chẩn đoán, giám sát bệnh do ZIKV. Quy trình xét nghiệm được thực hiện với nồng độ kháng IgM người gắn bảng là 5 µg/ mL trong đệm carbonate pH 9,6, huyết thanh bệnh nhân được pha loãng 1:20 trong dung dịch PBS sữa 1%; kháng nguyên Zika và
cộng hợp kháng Flavi 6B6C đánh dấu emzyme HRPO được sử dụng ở hiệu giá lần lượt là 1:10, 1: 1000 trong dung dịch PBS sữa 1%. Quy trình được đánh giá trên bộ mẫu chuẩn bao gồm 18 mẫu dương, 31 mẫu âm đạt kết quả độ nhạy và độ đặc hiệu tương ứng là 88,9% và 96,8% và có sự tương đồng với kết quả của NEKKEN (k = 0,87, Mc Nemar test).
Summary:
The frst case of Zika virus (ZIKV) was recorded in Ho Chi Minh City and Khanh Hoa
in April 2016. Vietnam has recorded more cases of ZIKV infection after that. MAC-ELISA test has become widely used for detection of anti-ZIKV IgM antibodies in various serological studies of Zika infection. Pasteur Institute in Ho Chi Minh City has developed a MAC-ELISA in-house test kit to detect antiZIKV IgM antibodies in order to serve ZIKV diagnosis, surveillance. The optimized protocol as following anti human IgM concentration of 5µg/mL in pH carbonate buffer of 9.6, patient serum was diluted 1:20 in 1% milk PBS solution; Zika antigen and anti-Flavi 6B6C antigen-labeled HRPO enzyme were used at the titer of 1:10, 1:1000, respectively in 1% milk PBS solution. The procedure was evaluated on a set of standard samples consisted of 18
positive samples, 31 negative samples that achieved a sensitivity, and specifcity of 88.9%, and 96.8%, respectively, and were similar to NEKKEN results (k = 0.87, Mc Nemar test).
Từ khóa:
Xây dựng quy trình, MAC-ELISA, Zika, kháng thể IgM, 6B6C-HRPO
Keywords:
IgM antibody, Zika, MACELISA, 6B6C-HRPO.
File nội dung:
o1911148.pdf
Tải file:
