Trang: 29
Tập 31, số 6 2021
CHUẨN HÓA KỸ THUẬT REALTIME PCR PHÁT HIỆN VI KHUẨN LEPTOSPIRA TỪ BỆNH PHẨM LÂM SÀNG TẠI VIỆT NAM
STANDARDIZED REALTIME – PCR ASSAYS FOR DETECTION OF LEPTOSPIRA FROM CLINICAL SPECIMENTS IN VIETNAM
Tác giả: Lương Minh Hòa, Hoàng Thị Thu Hà, Đỗ Bích Ngọc, Lê Thị Phương Mai,
Nguyễn Tự Quyết, Phan Đăng Thân, Trần Văn Đình, Phạm Thanh Hải
Tóm tắt:
Leptospirosis là bệnh của động vật truyền sang người, do vi khuẩn Leptospira gây nên. Bệnh có đặc
điểm lâm sàng đa dạng, dễ bị chẩn đoán nhầm với các bệnh nhiễm khuẩn khác. Do vậy việc chẩn đoán
sớm bệnh ở giai đoạn đầu có giá trị rất quan trọng trong điều trị cho bệnh nhân. Kỹ thuật realtime PCR
phát hiện được vi khuẩn Leptospira gây bệnh ở ngay giai đoạn đầu của bệnh, đã được ứng dụng ở nhiều
nước trên thế giới và được coi là phương pháp tối ưu trong chẩn đoán sớm các bệnh nhân nghi ngờ mắc
Leptospirosis. Trong nghiên cứu này, realtime PCR sử dụng mồi và đầu dò được thiết kế dựa trên trình
tự nucleotide của gen lipL32, gen độc lực quan trọng và có ở tất cả các loài Leptospira gây bệnh. Kỹ thuật
được chuẩn hoá với độ đặc hiệu 100% và ngưỡng phát hiện tối thiểu là 9 bản sao/phản ứng. Ứng dụng kỹ
thuật này phát hiện Leptospira trong 120 mẫu máu và nước tiểu được thu thập từ bệnh nhân, đã xác định
được tỷ lệ Leptospira dương tính là 1,7% (2/120). Việc áp dụng realtime PCR này là hữu ích và khả thi tại
các phòng xét nghiệm tuyến tỉnh/thành phố tại Việt Nam.
Summary:
Leptopirosis is a bacterial zoonotic disease
caused by Leptospira, easily misdiagnosed
with other infectious disase. Therefore, the
dignosis of the disease in the early stage is very
important in the patient treatment. The real
time PCR assay detects the Leptospira in the
early diseas stage, has been applied in many
countries and is considered the optimal method
for diagnosis of suspected Leptopirosis. In this
study, real time PCR used primers and probe
designed based on the nucleotide sequence of
the lipL32 gen, which is important virulence
factor and is present only in pathogenic
Leptospira species. The assay was standardized
with 100% specifcity and a minimum detection
limit of 9 copies/reaction. Applied this assay to
detect DNA Leptospira from 120 blood and
urine samples shown that there were 2 positive
(1.7%). This realtime PCR application is useful
at provincial/city laboratories in Vietnam.
Từ khóa:
Leptospirosis; Leptospira; realtime PCR; gen lipL32
Keywords:
Leptospirosis; Leptospira; realtime PCR; gen lipL32
DOI: https://doi.org/10.51403/0868-2836/2021/371
File nội dung:
o210629.pdf
Tải file: