Trang: 57

Tập XXVI, số 4 (177) 2016

Direct nested PCR for detection of Histoplasma capsulatum from clinical specimens

Tác giả: Dương Ngọc Thuý, Hoàng Thị Thu Hà

Tóm tắt:
Histoplasmosis là một bệnh nấm toàn thân do Histoplasma capsulatum (H. capsulatum), có khả năng gây bệnh cho cả người và động vật. Bệnh thường khó chẩn đoán do trên 95% người bệnh không biểu hiện triệu chứng, hoặc có triệu chứng tương tự bệnh cúm, nhiễm trùng phổi. Kháng nguyên M glycoprotein được xác định là kháng nguyên chính có mặt cả ở giai đoạn cấp và mạn tính của bệnh. Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng phương pháp PCR tổ (nested-PCR) với các cặp mồi đặc hiệu (Msp1F/Msp2R và Msp2F/Msp3R) để phát hiện ADN -H.capsulatum. Phương pháp PCR tổ có thể phát hiện ADN của H.capsulatum ở nồng độ thấp 10 fg. Trong 2/94 mẫu bệnh phẩm dịch rửa phế quản từ các bệnh nhân nhiễm trùng phổi tại Bệnh viện 103 có kết quả dương tính với H. capsulatum bằng PCR tổ, trong khi các mẫu bệnh phẩm đều âm tính khi nuôi cấy. Mặc dù số trường hợp được xác định nhiễm nấm H. capsulatum trong nghiên cứu này thấp, nhưng cũng cho thấy rằng kỹ thuật chuẩn đoán phân tử là có tiềm năng giúp tăng độ tin cậy chuẩn đoán H.capsulatum. Tại Việt Nam, để tăng khả năng chẩn đoán Histoplasmosis, việc áp dụng phương pháp PCR tổ tại các phòng xét nghiệm vi sinh là cần thiết và khả thi.

Summary:
Histoplasmosis is a systemic mycosis caused by Histoplasma capsulatum (H.capsulatum), it is capable of causing disease in both humans and animals. The disease is often difficult to diagnose because over 95% of patients show assymptoms, or symptoms similar to the flu, lung infection. M glycoprotein antigen is identified as the main antigen both acute and chronic period of the disease. In this study, we used a nested PCR with the specific primers (Msp1F / Msp2R and Msp2F / Msp3R) has performed to detect DNA - H.capsulatum. Nested PCR could detect DNA at least 10 fg H.capsulatum DNA. Two of ninety-four bronchoalveolar lavage fluid (BALF) samples of lung infected patients at 103 Military Hospital were positive with the nested PCR, while it was negative by culture. Although the number of Histoplasmosis cases examined in this study was limited, it shows that molecular diagnosis technique has potential for increasing the reliability of histoplasmosis. In Vietnam, in order to increase diagnostic capabilities histoplasmosis, applied nested PCR in microbiological laboratories are necessary and feasibility

Từ khóa:
Histoplasmosis, H. capsulatum, PCR tổ, bệnh phẩm lâm sàng

Keywords:
Histoplasmosis, Histoplasma capsulatum, nested PCR, clinical samples

File nội dung:
O160457.pdf

Tải file:

Tải file với tiền ảo trong tài khoản thành viên.